西斯廷教堂（意大利语：Cappella Sistina），原名西克斯图斯礼拜堂，是梵蒂冈宗座宫内的一间房间，也是梵蒂冈博物馆的一部分。

自15世纪以来，枢机主教们便在此举行秘密会议，选举新教宗。

教堂的建造最初由彼得罗·佩鲁吉诺、桑德罗·波提切利、多梅尼科·吉兰达约和科西莫·罗塞利等画家组成的团队负责，他们的工作室和最亲密的合作者也参与其中，包括比亚乔·迪·安东尼奥、巴托洛梅奥·德拉·加塔和卢卡·西尼奥雷利。皮埃尔·马泰奥·达梅利亚则在穹顶上绘制了星空。

这些壁画绘制于1481年至1482年间，同时完成的还有以下大理石制品：栏杆、唱诗班席位（歌手就座的地方）以及入口上方的教皇徽章。1483年8月15日，西斯都四世为这座新教堂举行了祝圣仪式，并将其奉献给圣母升天。

在教皇尤利乌斯二世的命令下，米开朗基罗装饰了西斯廷教堂的穹顶。西斯廷教堂天顶的所有壁画均出自这位杰出艺术家之手，他耗时四年（1508年至1512年）完成了这项作品，创造了一件前所未有的艺术杰作，改变了西方艺术的进程。

九幅中心场景描绘了《创世纪》中的故事，从创世到人类的堕落，包括洪水以及诺亚一家重生人类的情节。

1533 年末，克莱门特七世·德·美第奇（1523 年至 1534 年在位的教皇）委托米开朗基罗对西斯廷教堂的装饰进行修改，在祭坛的后墙上绘制了《最后的审判》。